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一步法DNA扩增试剂盒

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产品说明
本产品直接以血液为模板,用抗抑制的2×Direct PCR Master Mix 进行扩增,扩增产物直接通过电泳检测。

适用范围
1. EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝方法保存的新鲜或冷冻血样;
2. 未加抗凝剂的血样和干血;
3. 血液基因组的扩增检测。
  一步法DNA扩增试剂盒的详细资料:

Direct 血液直扩试剂盒

 —— 一步法扩增试剂盒

 

产品介绍                      

本试剂盒以血液为模板直接进行DNA扩增,扩增产物可直接点样电泳。该试剂盒中含有设计的Taq酶突变体,这些使它能够耐受全血样品中存在的抑制剂。在大多数抗凝剂存在下,包括肝素、柠檬酸和EDTA等,Taq酶依然扩增性能良好。由于其可以从血液直接进行扩增,免除了繁琐的DNA提取步骤,加快了工作流程,降低了污染的风险。

 

产品特点

1. 简便:无需事先对血液进行提纯,直接用血液为模板扩增目的基因;

2. 高效:多数抗凝剂存在条件下,超强的抗抑制能力,能有效扩增杂质较多的模板。

 

产品用途

1.未加抗凝剂的血液样本;

2.添加了肝素、柠檬酸、EDTA 等抗凝剂的血液样本;

3.血液基因组扩增检测。

 

使用建议

1.使用时添加≤10%的全血为模板,若扩增不出目的条带, 酶量可加倍。加上血液后将管中各组分轻轻混匀。

2.2mM Mg2+可以满足绝大多数 PCR 扩增,对于某些 PCR, 为了保证较好的扩增,可调

节为 2-5mM。

 

保存温度

   -20℃保存。

 

产品组分

产品组成

体积

2 × Direct Blood PCR Buffer with Mg2+

1.25ml

dNTPs(各 10mM

100μl

Direct Taq DNA 聚合酶(400U

100μl

 

 

 

 

  •                                     

 常用反应体系 (25μl):

2 × Direct Blood PCR Buffer (with Mg2+*

10μl

上游引物

0.2-1.0 μM(终浓度)

下游引物

0.2-1.0 μM (终浓度

dNTPs(各10mM)

1μl

全血

0.1-2.5μl

Direct Taq DNA 聚合酶(400U)

1μl

ddH2O

至 25 μl

*Mg2+终浓度为 3.5mM

 

常用PCR设置

当扩增片段<3K

当扩增片≥(推荐引物长度≥30bp)

 

94℃, 1 分钟 30 秒

94℃,20 秒            

55-60℃,20 秒         30-40循环

72℃,1kb/60 秒

72℃ 5 分钟

4℃ 保温

 

94℃, 5 分钟

94℃,15 秒            30-40循环         

68℃,1kb/60 秒   

72℃ 5 分钟

4℃ 保温

 

 

 

产品相关关键字: 试剂盒
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