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限制性片段长度多态性
点击次数:314 发布时间:2013-07-29
 

 限制性片段长度多态性(RFLP),即由于单个碱基的缺失、重复和插入所引起限制性内切酶位点的变化,而导致DNApian段长度的变化。这是一类比较普遍的多态性。

RFLP是出现zui早, 现在依然使用zui普遍的DNA标记, 国内已有文献对之进行了详尽的介绍并以RFLP进行了不少研究。
RFL P 是一种共显性标记, 在分离群体中 纯合体可以与杂合体分开, 因而提供标记座位 完全的遗传信息。RFLP分析所需的DNA量较大, 但是膜做好以后可反复杂交几十次。另外, RFLP非常稳定, 多种农作物的RFLP分子遗传图谱已经建成, 因而利用RFLP图谱对未 知基因进行定位比较方便。不过, RFLP检测步骤较多, 周期长, 特别是只要检测少数几个探针时成本较高, 用作探针的DNA 克隆的制备保 存与发放也很不方便。另一个问题是检测中要 用到放射性同位素。尽管已有几种非同位素标记方法问世, 如美国BRL 公司的Biotin系统, 德国Boeh ringerMannhein 公司的D ig 系统和 英国Amersham 公司的ECL系统等, 它们的高价格, 低成功率和更多的实验检测步骤依然影 响在实际使用中的推广。

 
 
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